Thiết lập hệ thống đánh giá tính kháng bệnh héo xanh của cây cà chua trồng trong dung dịch (Mục lục)

TÓM TẮT LÊ DUY THANH, Đại Học Nông Lâm,Tp. Hồ Chí Minh, tháng 9 năm 2005. THIẾT LẬP HỆ THỐNG ĐÁNH GIÁ TÍNH KHÁNG BỆNH HÉO XANH CỦA CÀ CHUA TRỒNG TRONG DUNG DỊCH. Giáo viên hướng dẫn: TS. LÊ ĐÌNH ĐÔN Đề tài được tiến hành tại Trường Đại Học Nông Lâm,Tp. Hồ Chí Minh, thời gian từ 3/2005 đến 8/2005 Nội dung nghiên cứu Nội dung A: thiết lập hệ thống thủy canh trồng cà chua. - lựa chọn giá thể và môi trường dinh dưỡng thích hợp cho cây cà chua. Nội dung B: đánh giá tính kháng của cây cà chua trồng dung dòch với bệnh héo xanh do vi khuẩn Ralstonia solanacearum. - xác đònh các dòng vi khuẩn Ralstonia solanacearum bằng: + môi trường chọn lọc TZC. + Phương pháp PCR. - đánh giá tính kháng của cây cà chua trồng trong hệ thống thuỷ canh với bệnh héo xanh do Ralstonia solanacearum. Kết quả đạt được - Thiết lập được hệ thống thủy canh trồng cây cà chua. - Chọn lọc được môi trường dinh dưỡng thích hợp cho cây cà chua. - Vi khuẩn Ralstonia solanacearum cho phản ứng đặc hiệu với cặp primer PI- IS-F/PI-IS-R. là các dòng độc khi chọn lọc trên môi trường TZC. - chưa tìm được mật số vi khuẩn chủng bệnh thích hợp. iv MỤC LỤC Nội dung Trang Trang bìa............................................................................................................i Trang tựa........................................................................................................... ii Lời cảm ta.........................................................................................................iii Tóm tắt..............................................................................................................iv Mục lục .............................................................................................................v Danh sách các bảng..........................................................................................ix Danh sách các hình ...........................................................................................x Danh sách các từ viết tắt..................................................................................xi Chương 1: GIỚI THIỆU ......................................................................................1 1.1 Đặt vấn đề................................................................................................1 1.2 Mục đích nghiên cứu................................................................................2 1.3 Nội dung nghiên cứu................................................................................2 Chương 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .................................................................3 2.1 Khái quát về lòch sử thủy canh.................................................................3 2.2 Vai trò của các nguyên tố khoáng...........................................................3 2.2.1 Vai trò của các nguyên tố đa lượng......................................................4 2.2.1.1 Nitơ......................................................................................................4 2.2.1.2 Phospho...............................................................................................4 2.2.1.3 Kali......................................................................................................5 2.2.1.4 Magiê..................................................................................................5 2.2.1.5 Canxi...................................................................................................6 2.2.2 Vai trò của các nguyên tố vi lượng.......................................................6 2.2.2.1 Sắt (Fe)...............................................................................................6 v 2.2.2.2. Đồng (Cu)..........................................................................................7 2.2.2.3 Kẽm (Zn )...........................................................................................7 2.3 Ảnh hưởng của các điều kiện bên ngoài đến sự hút chất dinh dưỡng của hệ rễ trong hệ thống thuỷ canh.......................................................................7 2.3.1 Ánh sáng................................................................................................7 2.3.2 Nồng độ CO2......................................................................................................................................................7 2.3.3 Nhiệt độ.................................................................................................8 2.3.4 Nước.......................................................................................................8 2.3.5 Độ dẫn điện và pH................................................................................8 2.3.6 Sự phát triển của tảo trong hệ thống thuỷ canh....................................9 2.4 Bệnh và quản lý bệnh trong hệ thống thuỷ canh.....................................9 2.4.1 Các bệnh thường gặp trong trồng thuỷ canh.........................................9 2.4.2 Quản lý bệnh trong trồng thuỷ canh...................................................10 2.4.2.1 Quản lý bệnh trước khi có bệnh sảy ra............................................10 2.4.2.1 Quản lý bệnh khi có bệnh sảy ra....................................................11 2.5 Một số phương pháp trồng thuỷ canh và tình hình trồng thủy canh......12 2.5.1 Một số phương pháp trồng thủy canh..................................................12 2.5.1.1 Hệ thống thủy canh không hồi lưu...................................................12 2.5.1.2 Hệ thống thuỷ hồi lưu......................................................................12 2.5.1.3 Hệ thống khí canh.............................................................................12 2.5.2 Tình hình thuỷ canh ở Vòêt Nam.........................................................12 2.6 Các kỷ thuật chẩn đoán bệnh héo xanh.................................................13 2.6.1 Phương pháp nuôi cấy trên môi trường nhân tạo................................13 2.6.2 Phương pháp huyết thanh....................................................................13 2.6.3 Phương pháp chủng trên ký chủ..........................................................13 2.6.4 Phương pháp lai phân tử......................................................................13 2.6.5 Phương pháp PCR ( polymerase Chain Reaction)..............................14 vi 2.7 Tình hình nghiên cứu bệnh héo xanh do vi khuẩn R. solanacearum....14 Chương 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU........................16 Nội dung A: Thiết lập hệ thống thuỷ canh trồng cà chua.............................16 3.1 Thời gian và đòa điểm.............................................................................16 3.1.1 Thời gian..............................................................................................16 3.1.2 Đòa điểm..............................................................................................16 3.2 Vật liệu và phương pháp nguyên cứu....................................................16 3.2.1 Vật liệu và dụng cụ.............................................................................16 3.2.1.1 Vật liệu.............................................................................................16 3.2.1.2 Dụng cụ.............................................................................................16 3.2.2 Phương pháp nghiên cứu.....................................................................16 3.2.2.1 Cách pha dung dòch dinh dưỡng.......................................................16 3.2.2.2 Thiết lập hệ thống trồng cây cà chua..............................................19 3.2.2.3 Chỉ tiêu theo dõi...............................................................................20 Nội dung B: Đánh giá tính kháng của cây cà chua trông trong dung dòch đối với R. solanacearum.......................................................................................20 3.3 Thời gian và đòa điểm.............................................................................20 3.3.1 Thời gian..............................................................................................20 3.3.2 Đòa điểm..............................................................................................20 3.4 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu.....................................................20 3.4.1 Vật liệu và dụng cụ ............................................................................20 3.4.1.1 Vật liệu.............................................................................................20 3.4.1.2 Dụng cụ.............................................................................................21 3.4.2 Phương pháp nghiên cứu.....................................................................22 3.4.2.1 Phương pháp lấy mẫu.......................................................................22 3.4.2.2 Phân lập nuôi cấy và tồn trữ mẫu....................................................22 vii 3.4.2.3 Phương pháp xác đònh R. solanacearum bằng môi trường chọn lọc TZC............................................................................................................22 3.4.2.4 Phương pháp ly trích DNA tổng số ..................................................23 3.4.2.5 Phương pháp PCR.............................................................................24 3.4.2.6 Đánh giá tính kháng của cây cà chua đối với R.solonacearum.......25 3.4.2.7 Khả năng sinh trưởng và phát triển của R. solanacearum trong hệ thống thuỷ canh........................................................................26 Chương 4:KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .........................................................27 Nội dung A: Thiết lập hệ thống thuỷ canh trồng cà chua................................27 4.1 Chọn lọc môi trường thích hợp cho cho cây cà chua trồng thuỷ canh.....................................................................................................27 Nội Dung B: Đánh giá tính kháng của cây cà chua trồng trong dung dòch đối với R. solanacearum..............................................................................................32 4.2 Kết quả phân lập, tồn trữ mẫu.........................................................32 4.3Kết quả chọn lọc trên môi trường TZC............................................32 4.4 Kết quả kiểm tra bằng phương pháp PCR .....................................34 4.5 Đánh giá tính kháng của cây cà chua đối với R.solonacearum............................................................................................35 4.6 xác đònh mật số vi khuẩn R. solanacearum trong hệ thống thuỷ canh.........................................................................................................35 Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ............................................................37 5.1 Kết luận.................................................................................................37 5.2 Đề nghò...................................................................................................38 Chương 6: TÀI LIỆU THAM KHẢO...............................................................39 6.1 Tiếng Việt...............................................................................................39 6.2 Tiếng nước ngoài....................................................................................40 viii